胃癌组织中VEGF和ILK的表达及意义(2)

http://www.100md.com 2015年7月15日 中国当代医药2015年第20期

     1.2 试剂及方法

    1.2.1 主要试剂 鼠抗人ILK单克隆抗体，鼠抗人VEGF单克隆抗体，SABC免疫组化染色试剂盒，DAB显色盒，均购自福州迈新生物技术开发有限公司。

    1.2.2 方法 用免疫组织化学染色SABC法观察VEGF和ILK在胃癌中的表达分布情况。为保证判定结果的一致性，每次染色均设有已经证实的阳性表达的VEGF和ILK切片对照作为染色质量控制标准。以PBS代替一抗作为阴性对照，由2名有经验的病理医师独立观察切片。

    1.2.3 结果判定 在200倍视野下随机选取5个视野，记数每个视野中肿瘤上皮细胞的染色情况，取平均值。VEGF和ILK阳性着色位于细胞质中呈弥散或散在的棕黄色颗粒。根据瘤组织中阳性细胞的有无及数量，将其分为阴性(-)：未见阳性细胞；弱阳性(+)：阳性细胞少于10%；阳性(++)：阳性细胞11%～30%；强阳性(+++)：阳性细胞不低于30%[3]。

    1.3 统计学处理

    采用SPSS 19.0软件统计包分析，计数资料以率表示，采用χ2或Fisher精确概率法检验 ......