细胞黏附分子1在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的表达研究(2)
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1.2.2 上呼吸道组织活检取OSAHS气道阻塞部位咽部(咽咽弓)组织，采用免疫组化技术观察ICAM-1在咽组织的表达特点。用PBS代替一抗作空白对照。①石蜡切片：取厚度 5～7 μm的石蜡切片，常规脱蜡，梯度酒精水化，3%过氧化氢溶液甲醇液处理30 min以除去内源酶，PBS冲洗3 min×3次；②抗原修复：ICAM-1采用柠檬酸钠缓冲液置入微波炉抗原修复，98℃ 10 min；③加入过氧化酶阻断液后，室温下孵育10 min；④加入一抗，4℃冰箱过夜；⑤加入生物素标记的二抗，室温下孵育10 min；⑥PBS冲洗，二氨基联苯胺显色，苏木素复染，脱水，透明，封片。用图像分析法进行半定量分析。结果判断：胞浆内出现棕色或深棕色颗粒为阳性细胞。高倍镜下(×400)随机选取10个视野，每个视野计数100个细胞，计数阳性细胞的平均数。ICAM-1阳性染色细胞> 35%为(+ +)，15%～35%为(+)，<15%为(-)。
1.3 统计学分析
采用SPSS 11.0统计软件进行统计学处理，资料用均值±标准差表示，两组间比较采用两个独立样本均数比较的t检验，3组间比较采用单因素方差分析及q检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1各组间血清炎性细胞因子浓度比较
OSAHS+AAD组血清TNF-α、CRP、ICAM-1浓度均高于OSAHS组；OSAHS组血清TNF-α、CRP、ICAM-1浓度均高于正常对照组(表1)。
2.2 ICAM-1表达情况
总的表达阳性率为37%。OSAHS+AAD组高于OSAHS组，OSAHS组明显高于正常对照组(表2)。
3 讨论
近年的研究表明OSAHS可能与心血管疾病密切相关，有报道，约一半OSAHS患者变应原吸附实验阳性，气道变态反应性疾病易合并OSAHS，气道炎症使合并变态反应性疾病的OSAHS患者病情及治疗复杂化。目前OSAHS与气道变态反应性疾病二者的关系及机制尚不清楚。
细胞黏附分子(ICAM-1)是多种细胞表达的一种膜表面糖蛋白，它介导细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质的相互识别与作用，是重要的促炎症介质，在炎症反应和免疫应答中起重要作用。TNF-α等炎性介质能明显上调内皮细胞和上皮细胞ICAM-1的表达，上皮ICAM-1的表达程度与局部炎症密切相关。大量研究证实，ICAM-1在呼吸道变态反应性炎症中起重要作用[2-3]。本研究显示ICAM-1在OSAHS及气道变态反应性疾病患者中的表达显著高于正常对照组。其原理可能是在变应性炎症中，通过ICAM-1与淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)结合使T淋巴细胞黏附于抗原递呈细胞、内皮细胞核上皮细胞，引发变态反应的发生和发展[3]。
由于OSAHS长期缺氧，碳酸血症，睡眠结构紊乱，导致一系列病理生理变化。近年研究表明OSAHS患者血清存在细胞黏附分子、CRP、TNF-α、IL等前炎性因子水平增高。OSAHS患者呼出戊烷和NO水平增高。提示OSAHS同时存在系统性炎症和气道局部炎症。治疗上气道变态反应性疾病，可缓解OSAHS患者病情[4]。血清可溶性细胞黏附分子1水平升高参与OSAHS患者的心脑血管疾病的发病过程[5-6]，且血清可溶性细胞黏附分子1水平与OSAHS严重程度存在相关性[7]。
[参考文献]
[1]Mccoley SA,Carroll JL,Curtis S,et al.High prevalence of allergic sensitization in children with habitual snoring and structive sleep apnea[J].Chest,1997,111(10):170-173.
[2]张秋贵,李薇,郑东淑,等.细胞间黏附分子1和白细胞介素-6在变应性鼻炎和支气管粘膜中的表达及意义[J].临床耳鼻咽喉科杂志,2004,18(5):261-263.
[3]宋协一.变应性鼻炎与细胞黏附分子的关系及意义[J] ......
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