1. 2. 4 PBMC中HO-1/β-actin mRNA的表达率检测 西格列汀组、甘精胰岛素联合西格列汀组患者治疗前后及对照组入院时分别抽取静脉血5 ml， 装于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝真空采血管中。采用逆转录-聚合酶链反应法检测PBMC中HO-1/β-actin mRNA的表达率。分别应用淋巴细胞分离液分离PBMC， 用Trizol抽提液提取总RNA， 使用逆转录试剂盒(Takara公司生产)， 采用Primer5.0软件设计引物， HO-1的上游引物为5， -CTGGAGGAGGAGATTGAGCG-3， 下游引物为5， -TAAGGACCCATCGGAGAAGC-3。按试剂盒方法操作进行逆转录-聚合酶链反应， 加溶解曲线， 光密度值由计算机软件计算得出。分析三组PBMC中HO-1/β-actin mRNA的表达率。

    1. 3 观察指标 观察三组血糖及血脂与血清Nrf2、GST、SOD、HO-1、NQO1水平， 以及PBMC中HO-1/β-actin mRNA表达率的差异。血糖及血脂指标包括FPG、HbA1c、TG、TC、LDL-C ......