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跑步运动对小鼠端粒长度和体内氧化抗氧化的影响(3)
http://www.100md.com 2019年1月15日 《世界中医药》 20192
     3)化学法测定肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值变化、总超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的水平 10%肝组织匀浆的制备:用生理盐水制备10%肝组织匀浆,3 000 r/min,离心10 min,取上清。还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值的测定:取上清加入相关试剂在412 nm处检测吸光度值,与标准曲线比较,得到总谷胱甘肽含量,另一部分加入GSH清除试剂后,在412 nm处检测吸光度值,获得GSSG含量。SOD测定过程:取1 cm光径石英比色皿,紫外240 nm,双蒸水调零备用。取经过处理的肝组织匀浆(稀释10倍)20 μL加入比色皿底部,用移液器加入3 mL底物反应溶液,快速冲入比色皿中,240 nm处立即测定吸光度,记下OD1值,1 min后再次测一次吸光度,记下OD2数值,按照公式计算SOD浓度。CAT测定过程:按照南京建成研究所说明书测定孔和测定空白孔各加入20 μL待测肝组织上清,测定孔加入20 μL酶工作液,测定空白孔加入20 μL酶稀释液;然后每孔加入200 μL底物应用液 ......
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