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编号:13600939
金钗石斛叶中总黄酮的提取分离及体外抗阿尔茨海默病活性研究(3)
http://www.100md.com 2018年2月1日 《中国药房》 20183
     2.5 Aβ42蛋白聚集抑制活性

    精密称取Aβ42蛋白0.2 mg,用1%NH3·H2O溶液100 μL溶解,然后用20 mmol/L的磷酸盐缓冲液稀释至20 μmol/L。取B、C、D溶液各150 μL,分别加入150 μL的Aβ42蛋白溶液作为样品溶液,阴性对照为150 μL的 Aβ42蛋白溶液与150 μL磷酸盐缓冲液,阳性对照为20 μmol/L的姜黄素溶液。样品空白分别为B、C、D溶液以及姜黄素溶液各150 μL与150 μL缓冲溶液的混合液,背景空白为300 μL的缓冲溶液与2 700 μL的硫磺素T溶液的混合液。将上述溶液混匀后,在37 ℃条件下反应72 h,然后分别加入2 700 μL的硫磺素T溶液(5 μmol/L,用甘氨酸-氢氧化钠缓冲液配制),混匀,反应2 min。最后测试荧光吸收值,其中激发波长为450 nm、发射波长为482 nm[13]。每个样品均重复3次,计算Aβ42蛋白聚集抑制率[Aβ42蛋白聚集抑制率(%)=(1-IFi/IFc)×100%。式中,IFi指样品扣除样品空白后的荧光吸收值,IFc指阴性对照扣除背景空白后的荧光吸收值] ......
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